由于结合曲线的化学计量性质,该值是真实的上限值,的复合物。为了测量从延伸复合物中的解离速率,用过量的未标记追踪预先形成的荧光复合物。通过荧光各向异性随时间的减少来测量荧光复合物的解离图。与其高亲和力一致,复合物以×的缓慢速率常数解离,这表明寿命解离速率为小时。该解离速率比报道的解离速率慢约倍来自一项研究,其中使用了缺乏下游和上游双链区域的杂合底物。这表明中的上游和下游双链体区域稳定结合。
总的来说,我们的结果表明在无启动子的延伸底物上形成高
亲和力和长寿命的复合物。因此,是估计正确和不正确的核苷酸掺入匈牙利企业电子邮件列表率的极好底物。和正确核苷酸掺入的单周转动力学的正确核苷酸掺入率是在单周转动力学条件下测量的。将和的混合物与给定浓度的+在快速淬灭流仪器中在°下孵育。过量的确保了伸长率测量的单周转动力学条件。简而言之,反应物在毫秒至秒内混合并猝灭,在%聚丙烯酰胺尿素测序凝胶上解析,并在图像分析后进行定量。
添加后,在几毫秒内将的聚体延长至聚体图
和。在上,由于存在 B2B电话列表 两个连续的+和+,添加了两个,并将聚体延长至聚体,然后延长至聚体图。聚体和+聚体生成的动力学符合单指数方程以获得正确的核苷酸掺入速率常数图。使用和底物进行了类似的实验。结果表明,在μ下以至之间的速率常数添加正确的核苷酸。下载:下载高分辨率图像下载:下载全尺寸图像图正确的在延伸基质上的核苷酸掺入动力学。,显示了具有所有