以制备延伸气泡底物图。使用不同的+模板碱基或制备四种这样的底物,这使我们能够测量正确和不正确的核苷酸掺入率。伸长基质缩写为,其中+代表模板基础。为了测量转录的保真度,我们测量了正确和错误核苷酸的掺入率。使用同一组底物来比较三个单亚基的保真度非常重要,因为各个错误掺入效率可能取决于模板碱基周围的局部序列。先前已研究过的正确核苷酸添加动力学;因此,以下部分重点介绍通
过线粒体特别是测量正确核苷酸的动力学下载:下载高
分辨率图像下载:下载全尺寸图像图。与伸长基质复合的和。,显示了的结构和序列。显示为绿色。代表模板碱基,为或。,羧基荧光素。,左图显示了测量复合物平衡的实验设计。荧光素标记的在°下用浓罗马尼亚商务电子邮件列表度增加的进行滴定,并在添加的的每个浓度下测量荧光各向异性的增加。将右图中的结果数据拟合到二次方程以获得所示的值。,左图显示了测量来自的荧光素标记的解离速率的实验设计。荧光素标记的和的复合物用未标记的进行追踪,
并且由于荧光素标记的从解离而导致的荧光各向异性的降
低被测量为添加追逐 B2B电话列表 后时间的函数。将右图中的动力学拟合到单指数方程以获得±×的解离速率。实验进行了两次,并显示了代表性数据。首先,我们使用平衡结合和动力学解离速率实验测量了对的亲和力。为了确定复合物的平衡解离常数,用浓度不断增加的滴定荧光素标记的图。我们观察到与的化学计量结合图。将数据拟合到二次方程以评估复合体的。