载到凝胶上。电泳后使用蛋白质印迹装置将解析的蛋白质转移至硝酸纤维素膜来自的。使用四种主要多克隆抗体之一对硝酸纤维素膜进行免疫印迹蓝藻;蓝藻;烟草;烟草的小亚基;和的。用于检测的一抗多克隆抗体是使用从大肠杆菌中纯化的带有标签的蛋白在兔体内生成的英国在免疫印迹中以的稀释度使用在免疫金标记中以至的稀释度使用并且对具有高度特异性图。通过山羊抗
兔过氧化物酶缀合的二抗使一抗可视化。使用抗和蓝藻抗体
的免疫印迹测定叶中聚球藻和的绝对和相对含量。通过与真实的蛋白质标准品纯化的和蓝藻进行比较来估计粗叶匀浆中存在的和的量。和蓝藻的量是重复测定的平均值标准差。使用软件美国获得条带强度并使用获得标准曲SMS Gateway爱沙尼亚线。蓝藻和蛋白的纯化如前所述使用载体在大肠杆菌细胞中表达聚球藻。通过离心收获该材料并重悬于含有和细菌蛋白酶抑制剂混合物的缓冲液中。纯化中的所有步
骤均在°下进行。对收获的细胞进行超声处理并通过离心分钟°去除
细胞碎片。和添加到上清 B2B电话列表 液中最终浓度分别为和。在℃下分钟后通过离心分钟℃沉淀沉淀的并将沉淀重悬于三乙醇胺中ε氨基己酸苯甲脒甘油和。使用用相同缓冲液预平衡的柱对该材料进行阴离子交换色谱。在同一缓冲液中用梯度洗脱。含有最高活性的级分通过依赖性判断同化通过尺寸排阻色谱法使用×直径进一步纯化和脱盐。使用预平衡和开发的色谱柱。使用容量截止离心浓缩器通过超滤浓缩所得蛋白质峰。将来自的扩增的基